突破桎梏！CAR-T 細胞的外泌體克服 CAR-T治療困境

要說近年來火的癌癥療法，免疫療法中的嵌合抗原受體 T 細胞（CAR-T）是焦點之一。CAR-T 的出現(xiàn)極大地改變了癌癥免疫治療領(lǐng)域的格局，它不僅讓曾經(jīng)在臨床上被宣判"死刑"的患者重獲新生，也讓免疫療法的理念成為了現(xiàn)實--通過利用免疫系統(tǒng)的力量來對抗惡性腫瘤。

在全球癌癥細胞免疫治療領(lǐng)域，CAR-T 細胞療法依舊是獨占鰲頭。

據(jù)不完全統(tǒng)計，自2017年諾華的替沙來賽獲美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)上市以來，全球共有11個 CAR-T 細胞療法產(chǎn)品獲批上市。2021年6月，我國首批準(zhǔn) CAR-T 細胞療法產(chǎn)品上市。

CAR-T 全稱為嵌合抗原受體T細胞（Chimeric antigen receptor T cell），CAR-T 細胞療法的基本原理就是提取患者自身的關(guān)鍵免疫細胞--T細胞，給它嵌入一種嵌合抗原受體（CAR），該受體能夠在識別腫瘤細胞表面抗原的同時，激活 T 細胞殺死腫瘤細胞。打個比方說，T 細胞如果是一支"普通軍隊"，那么 CAR-T 細胞就是一支擁有 GPS 的"特種部隊"，能夠精定位到"敵軍"即腫瘤細胞的位置，并將其殲滅，實現(xiàn)對患者的靶向治療。

1989年，T 細胞嵌合受體技術(shù)被發(fā)現(xiàn)，直到1993年出第一代 CAR-T，隨后CAR-T 相關(guān)技術(shù)被不斷發(fā)現(xiàn)和證實，而其臨床價值也被臨床前和臨床試驗所證實。

隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)免疫逃逸、CAR 與靶抗原識別能力下調(diào)與 CAR-T 細胞的衰竭等是造成腫瘤復(fù)發(fā)的重要因素，而免疫逃逸是造成患者發(fā)生腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)鍵與潛在因素，這與腫瘤細胞自身的靶抗原發(fā)生剪接異常與基因突變密切相關(guān)。除此之外，細胞因子風(fēng)暴也是嚴重制約著 CAR-T 療法治療腫瘤患者的更大規(guī)模臨床應(yīng)用的重大因素。當(dāng)前已經(jīng)開發(fā)出了許多方法試圖克服上述的困難，例如開發(fā)出多靶點 CAR、微調(diào) CAR 結(jié)構(gòu)、調(diào)節(jié)親和力與人工覆蓋靶抗原等方法。但是這些并未從根源上緩解 CAR-T 療法在實體瘤應(yīng)用的困境。

3月18日，河南科技大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院梁高峰教授團隊在International Journal of Nanomedicine 發(fā)表了題為"Emerging Strategies to Overcome Current CAR-T Therapy Dilemmas - Exosomes Derived from CAR-T Cells"的綜述，介紹了基于 CAR-T 細胞的腫瘤治療方法，包括 CAR-T 療法的特點和優(yōu)勢、該領(lǐng)域存在的局限性以及試圖克服這些局限性的方法。此外，文章還強調(diào)了利用 CAR-T 細胞釋放的外泌體治療腫瘤的優(yōu)勢，預(yù)測了在臨床試驗中可能出現(xiàn)的問題，并根據(jù) CAR-T 細胞外泌體的研究以及外泌體的特性，提出了克服這些挑戰(zhàn)的策略。值得一提的是，此綜述還討論了外泌體大規(guī)模制備的困境，并為未來的臨床應(yīng)用提供了可靠的解決方案。

為解決當(dāng)前 CAR-T 療法臨床應(yīng)用中遇到的挑戰(zhàn)，一種新的基于外泌體的策略已經(jīng)被開發(fā)出來。該策略在臨床前模型中成功展示了其的抗腫瘤作用，目前正在考慮進行臨床試驗。外泌體能在惡劣的腫瘤微環(huán)境中保持活性還具備來源細胞的生物功能，例如來自免疫細胞的外泌體也獲得了原細胞的特性，這使得使用免疫細胞釋放的外泌體來治療具有治療效果的腫瘤，如 NK 細胞、T 細胞和 CAR-T 細胞具有刺激作用。那么，來自 CAR-T 細胞的外泌體也繼承了 CAR-T 細胞殺傷性與靶向性，不僅如此，由于外泌體納米級別的顆粒，這使得來自 CAR-T 細胞的外泌體能夠有效浸潤實體瘤的內(nèi)部以實現(xiàn)對實體瘤的有效殺傷，這表明 CAR-T 細胞的外泌體具備治療實體瘤的巨大潛力。

有研究發(fā)現(xiàn)，CAR-T 細胞在受到腫瘤細胞的刺激時，可以釋放更多的外泌體。這些外泌體表現(xiàn)出更強的與腫瘤結(jié)合的能力并發(fā)揮抗腫瘤作用。此外，CAR-NK 細胞衍生的外泌體也有報道顯示出 CAR-NK 細胞特異性殺傷活性，顯示出特殊的抗腫瘤作用。這一發(fā)現(xiàn)表明，利用基于 CAR 的免疫細胞(如 CAR- T、CAR-NK、CAR- M)衍生的外泌體是推動 CAR 療法走向臨床應(yīng)用的關(guān)鍵一步。

除此之外，外泌體與活的 CAR-T 細胞不同，外泌體不會以相同的方式對周圍環(huán)境做出反應(yīng)，這使得它們能夠有效地避免 CRS 的發(fā)生，并且不受腫瘤免疫抑制微環(huán)境的影響。

有趣的是，外泌體本身是優(yōu)的納米級藥物載體，不僅在體內(nèi)具有相容性和安全性，而且還被證明可以攜帶額外的化療藥物以增強抗腫瘤效果。外泌體攜帶治療藥物和 miRNA 或 siRNA，使其不僅能靶向淺表腫瘤細胞，還能靶向深部腫瘤細胞，有效殺傷腫瘤。CAR-T 細胞外泌體除了裝載外，還在脈管系統(tǒng)和腫瘤微環(huán)境中表現(xiàn)出持續(xù)的活力，這表明工程化 CAR-T 外泌體策略的發(fā)展可能會進一步完善這種治療方法，以實現(xiàn)治腫瘤的目標(biāo)。

來自 CAR-T 細胞的外泌體被認為是克服 CAR-T 治療障礙的前景的解決方案。外泌體的負載特性允許進一步改進治療特性，并且它們也繼承了 CAR-T 的諸多優(yōu)點，從而有可能在臨床試驗中使用 CAR-T 細胞的外泌體進行實體瘤治療。為了解決與 CAR 和腫瘤抗原靶向相關(guān)的挑戰(zhàn)，研究人員提出了外泌體結(jié)合的創(chuàng)新方法，將融合酶裝載到外泌體中，調(diào)節(jié)異常剪接的激酶，以及遺傳可能在該領(lǐng)域開發(fā)的新型 CAR-T 都是治療實體瘤的可能策略。另外，通過自上而下的策略制備外泌體可以降低成本，使其成為更經(jīng)濟合理的解決方案。