尿路念珠菌感染的菌種構(gòu)成及其體外對(duì)抗真菌藥物耐藥性的變遷分析

　　 作者：孔超,董娜,孔令文　　作者單位：山東棗莊礦業(yè)集團(tuán)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科,山東棗莊,277011

　　【摘要】 尿液標(biāo)本念珠菌的分離率逐年增高，對(duì)抗真菌藥物耐藥率呈升高趨勢(shì)。臨床上應(yīng)重視念珠菌的培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，要加強(qiáng)念珠菌耐藥性監(jiān)測(cè)，科學(xué)合理使用抗真菌藥物。
　　【關(guān)鍵詞】真菌分布,耐藥變遷

　　近年來，由于免疫抑制劑和廣譜抗生素的使用，尿路念珠菌感染發(fā)病率逐步升高，作者對(duì)2007年至2009年各臨床科室尿路感染病人尿標(biāo)本的念珠菌進(jìn)行鑒定，并對(duì)檢測(cè)到的主要念珠菌菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)分析，現(xiàn)報(bào)告如下：
　　1 資料與方法
　　1.1一般資料 2815份尿標(biāo)本均為本院臨床科室送檢。培養(yǎng)基：沙氏培養(yǎng)基，血液培養(yǎng)基及中國(guó)蘭培養(yǎng)基(培養(yǎng)基干粉由法國(guó)生物-梅里埃公司生產(chǎn))由我科配制 ，科瑪嘉顯色培養(yǎng)基(由貝瑞特生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供)。恒溫電熱培養(yǎng)箱(江蘇蘇泰公司生產(chǎn))。VITEK-32鑒定系統(tǒng)，由法國(guó)生物-梅里埃公司生產(chǎn)。ROSCO紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)包含5種抗真菌藥物，即氟康唑(25 ug)，氟胞嘧啶(10 ug)，兩性霉素B(10 ug)，制霉菌素(50 ug)，伊曲康唑(8 ug)，念珠菌藥敏培養(yǎng)基(改良SHADOMY培養(yǎng)基)，均由丹麥ROSCO生產(chǎn)。
　　1.2方法 將尿液標(biāo)本接種沙氏培養(yǎng)基，中國(guó)蘭培養(yǎng)基和血液培養(yǎng)基，35℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24-48小時(shí)，沙氏培養(yǎng)基28℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24-48小時(shí)，挑取可疑菌落，接種科瑪嘉顯色培養(yǎng)基同時(shí)使用VITEK-32　YBC卡上機(jī)鑒定，必要時(shí)補(bǔ)充糖同化和發(fā)酵試驗(yàn)，用ROSCO紙片擴(kuò)散法做藥敏試驗(yàn)：嚴(yán)格按ROSCO紙片擴(kuò)散法操作步驟將稀釋好的菌液涂布在改良的SHADOMY培養(yǎng)基上，無菌手續(xù)貼好藥敏紙片，35-37℃ 孵育18-24小時(shí)后讀取結(jié)果。所得結(jié)果歸類成敏感、中度敏感或耐藥。藥敏結(jié)果判斷嚴(yán)格按ROSCO提供的紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)使用說明書中的折點(diǎn)判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。
　　2 結(jié)果

　　2.1菌株分離結(jié)果 3年間分離真菌277株，2007年至2009年分別為60株、86株、131株，四種分離多的念珠菌株為熱帶念珠菌99株，白色念珠菌87株，光滑念珠菌51株和克柔念珠菌31株，念珠菌感染菌株分離情況分析如下：2007年以白色念珠菌(33.3%)為主，2008年以白色念珠菌(37.2%)和熱帶念珠菌(36.0%)為主，2009年又增加了克柔念珠菌、近平滑念珠菌。
　　2.2真菌菌株對(duì)抗真菌藥物的敏感性　277株真菌對(duì)5-氟胞嘧啶、兩性霉素B、制霉菌素、伊曲康唑、氟康唑5種抗真菌藥物的敏感百分率分析如下：5-氟胞嘧啶、兩性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，其次為伊曲康唑，而氟康唑的耐藥性不容樂觀，因而臨床對(duì)唑類藥物應(yīng)用較多有關(guān)，但隨著臨床上的大量應(yīng)用，出現(xiàn)了耐氟康唑的白色念珠菌和其他耐氟康唑的念珠菌呈上升趨勢(shì)，熱帶念球菌對(duì)氟康唑的耐藥性較為嚴(yán)重，應(yīng)引起臨床重視，另外需注意的是處于中介度的菌株占有一定比例，唑類藥物存在交叉耐藥現(xiàn)象。氟胞嘧啶更易使念珠菌對(duì)其產(chǎn)生耐藥性，而且日趨嚴(yán)重。
　　3 討論

　　通過分析可以看出：白色念珠菌仍是引起臨床感染的主要真菌，但其構(gòu)成比由2007年的33.3%降至2008年26.7%，而熱帶念珠菌的構(gòu)成比3年間增加了8.2%，3年來念珠菌的分離株數(shù)大幅增多，念珠菌菌屬也逐年增多。隨著檢驗(yàn)技術(shù)的進(jìn)步和研究的深入，新的條件致病菌還會(huì)不斷地被發(fā)現(xiàn)。非白色念珠菌引起的尿路感染遠(yuǎn)較其他部位念珠菌感染中非白念珠菌引起多見，可能與尿液成分和pH值更適合非白念珠菌生長(zhǎng)有關(guān)，熱帶念珠菌的檢出率逐年增加，上升為位，取代了白色念珠菌，另外，菌種分布有多樣化的趨勢(shì)，這可能與實(shí)驗(yàn)條件、操作方法以及抗真菌治療的干預(yù)、生態(tài)學(xué)變化和人員流動(dòng)等因素有關(guān)，另外也與我省氣候條件、環(huán)境衛(wèi)生狀況有一定的關(guān)系。臨床應(yīng)合理使用抗生素，在治療過程中密切觀察念珠菌檢出情況，一旦出現(xiàn)念珠菌感染盡快調(diào)整治療方案，避免預(yù)防性抗生素的使用。
　　近年來，醫(yī)院內(nèi)念珠菌感染和發(fā)病率日趨上升，且隨著抗真菌藥物的應(yīng)用，念珠菌耐藥性也明顯增加。隨著抗真菌藥物的增多，將不同作用機(jī)理的藥物聯(lián)合應(yīng)用，以期產(chǎn)生協(xié)同作用。
　　近年來念珠菌感染的發(fā)生率迅速升高，尿路念珠菌感染成為重要的醫(yī)院內(nèi)感染之一。檢驗(yàn)科需要進(jìn)一步普及和推廣規(guī)范的抗念珠菌藥物敏感性試驗(yàn)法，爭(zhēng)取不同地區(qū)之間在操作規(guī)范、結(jié)果準(zhǔn)確等方面確實(shí)具有可比較性。廣大醫(yī)務(wù)工作者不但應(yīng)對(duì)念珠菌感染引起高度重視，應(yīng)建立有效的早期診斷，嚴(yán)格控制和合理使用抗生素及抗真菌藥物，以減緩耐藥菌株的上升。
　　【參考文獻(xiàn)】
　　[1]吳彼得.尿路真菌感染.臨床腎臟病雜志，2008，8(6)：251-253.

　　[2] Fung JJ. Fungal infection in liver transp lantation[J].Transpl Infect Dis,2002,(suppl3)：s18-s23.