乳腺癌組織胸苷磷酸化酶的表達(dá)

          【摘要】 目的探討人乳腺癌組織胸苷磷酸化酶(TP)的表達(dá)水平及其與臨床病理特征的關(guān)系。方法應(yīng)用免疫組化S-P法 檢測(cè)乳腺癌組織54例和正常乳腺組織20例中TP的表達(dá)。結(jié)果TP蛋白在乳腺癌組織中陽性表達(dá)率為77.8%．顯著高于正常乳腺組織的40.0% (P<o.os)。不同組織學(xué)分級(jí)的TP蛋白表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，TP蛋白高表達(dá)率與乳腺癌組織學(xué)分級(jí)有關(guān)(P<o-01)。結(jié)論TP蛋白在乳腺癌組織中表達(dá)增強(qiáng)，其表達(dá)與乳腺癌的組織學(xué)分級(jí)有關(guān)，其高表達(dá)提示預(yù)后不良。 
          【關(guān)鍵詞】 乳腺癌；胸苷磷酸化酶胸苷磷酸化酶( thymidine phosphorylase，rIP)即血小板源 性內(nèi)皮細(xì)胞生長因子，廣泛存在于原核生物及真核生物細(xì)胞中，是近年來發(fā)現(xiàn)的5-氟尿嘧啶(5-Fu)代謝途徑中的關(guān)鍵酶，臺(tái)皂催化5-Fu前體藥在瘤內(nèi)激活[IJ.該酶同時(shí)又具有促進(jìn) 內(nèi)皮細(xì)胞遷徙以及抗細(xì)胞凋亡的作用，從而在促進(jìn)血管生成中發(fā)揮重要作用[2]。它與腫瘤的血管生成、浸潤和轉(zhuǎn)移，化療效果及進(jìn)展預(yù)后均有密切聯(lián)系[3]。本斫究作者檢測(cè)了TP在人乳 腺癌中的表達(dá)，并探討TP在乳腺癌中的表達(dá)及其與臨床病理 特征之間的關(guān)系，為臨床治療提供理論依據(jù)。 
          1資料與方法 
          1.1研究對(duì)象河源市人民醫(yī)院2006年1月到2011年1月手術(shù)切除的54例乳腺癌和20例正常乳腺組織標(biāo)本，年齡26 -73歲，平均(46.7±8.6)歲。所有標(biāo)本均由兩位以上職稱病理醫(yī)師診斷并再次確認(rèn)，所有患者術(shù)前均未進(jìn)行放療和化 療。運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)54例乳腺癌標(biāo)本及20例正常對(duì)照標(biāo)本中TP蛋白的表達(dá)水平。 
          1.2 TP蛋白表達(dá)的檢測(cè)所有組織標(biāo)本在采集送檢后先用10%福爾馬林液固定、石蠟包埋、SpL厚連續(xù)切片，再采用S-P法 按照S-P試劑盒操作說明書進(jìn)行免疫組化染色。S-P試劑盒購自福建邁新生物公司。 
          1.3結(jié)果判讀將定位于腫瘤細(xì)胞胞漿、染成棕黃色的標(biāo)本判讀為TP表達(dá)陽性，根據(jù)每張切片的陽性細(xì)胞率、陽性細(xì)胞著色強(qiáng)度分別進(jìn)行計(jì)分，陽性切片標(biāo)本為細(xì)胞胞漿內(nèi)染色呈棕黃色者，陰性切片標(biāo)本的胞漿內(nèi)為未見棕黃色顆粒者，陽性程度 根據(jù)不同積分值進(jìn)行判讀，0分為陰性、1分為弱陽性、2分為陽性、3分為強(qiáng)陽性，細(xì)胞核也被著色時(shí)可判讀為’rP蛋白強(qiáng)陽性表達(dá)。陽性細(xì)胞率以計(jì)數(shù)每5個(gè)高倍鐃視野所有細(xì)胞為準(zhǔn)，顯微鏡高倍視野下平均每個(gè)視野內(nèi)陽性細(xì)胞所占比例≤5%為0分．6% - 300-/0為1分，31% - 70%為2分，超過71%則為3分。按照兩項(xiàng)之和處于1-3分間為低表達(dá)rIP蛋白，處于4-6分間為高表達(dá)rIP蛋白。 
          1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用x=檢驗(yàn)及Fisher's精確概率檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義：
          2結(jié)果
          2.1乳腺癌和正常乳腺組織中TP蛋白表達(dá)情況1P蛋白在乳腺癌組織中高表達(dá)，在壞死的腫瘤組織中則不表達(dá)。1P蛋白在 乳腺癌組織中的陽性表達(dá)率顯著高于正常乳瞻組織，差異有統(tǒng) 計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表l。 2.2 TP蛋白表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系乳腺癌組織中TP蛋白的表達(dá)與患者年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān) 聯(lián)(P>0.05)，但不同組織學(xué)分級(jí)的TP蛋白表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(_P<0.01)。見表2。 
         

          3討論
          TP是由2條多肽鏈組成、參與核苷代謝的同源二聚體，TP能特異性地作用于胸苷并使其發(fā)生可逆性磷酸化反應(yīng)，從而 調(diào)節(jié)體內(nèi)胸苷的代謝水平。其主要作用表現(xiàn)在參與催化胸腺嘧啶脫氧核苷、脫氧尿嘧啶及其類似物的可逆性磷酸化，進(jìn)而維持體內(nèi)胸苷水平的穩(wěn)定。TP還參與氟尿嘧啶類藥物的代謝活化 并生成具有抗癌活性的產(chǎn)物。同時(shí)TP有較強(qiáng)的趨化內(nèi)皮細(xì)胞、 促進(jìn)血管生成的作用，有研究[-1顯示，TP在多種腫瘤的血管 發(fā)生和浸潤方面起著重要作用，如結(jié)腸癌、乳腺癌、胃癌、膀胱癌等。TP茌體內(nèi)分布廣泛，表達(dá)差異也較大。還有研究[5]顯示，TP在許多實(shí)體瘤中的表達(dá)高于相應(yīng)起源的正常組織，如 胃、結(jié)腸、膀胱、宮頸、卵巢、腎臟等。研究[s]表明，間質(zhì) 含量的不同也會(huì)影響TP水平，腫瘤組織中TP高表達(dá)與腫瘤的 巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等間質(zhì)含量不同有關(guān)。 本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織的TP含量升高明顯，顯著高于 正常乳腺組織，這與Ruckhaberle等[，1的研究一致，提示TP蛋白在乳腺癌組織與正常組織中的表達(dá)差異可進(jìn)一步提示腫瘤 是否發(fā)生轉(zhuǎn)移；根據(jù)Ruckhaberle等[7]以及Wang等[s3學(xué)者 的研究結(jié)果，提示TP的高表達(dá)與腫瘤的不良預(yù)后有顯著關(guān)系，而本研究結(jié)果也與報(bào)道相符。同時(shí)研究結(jié)果也顯示乳腺癌組織 中TP蛋白的表達(dá)率在不同的組織學(xué)分級(jí)中有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而 與年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)，這進(jìn)一步提示TP在乳腺癌的進(jìn)展中起重要作用，TP高表達(dá)可提示乳腺癌的不良預(yù) 后。TP表達(dá)與乳腺癌分化程度有密切關(guān)系，這可能與TP本身在細(xì)胞DNA代謝中的作用、與5-FU的關(guān)系及TP在促進(jìn)乳腺 癌血管生成中所起的作用進(jìn)而影響乳腺癌的進(jìn)展過程，而國外 一些研究資料[91提示乳腺癌腫瘤細(xì)胞通過某些機(jī)制導(dǎo)致TP高表達(dá)，麗且由于TP在乳腺癌血管生成中的重要作用，對(duì)癌細(xì)胞的生物學(xué)特性產(chǎn)生影響，增強(qiáng)了其惡性行為，這些也進(jìn)一步證實(shí)了TP在促進(jìn)乳腺癌血管生成中具有重要作用。目前多數(shù)學(xué)者叫認(rèn)為TP可以作為惡性腫瘤的預(yù)后因子，其高表達(dá) 提示不良的預(yù)后，抑制TP的表達(dá)能抑制腫瘤的血管形成，阻 斷乳腺癌的發(fā)生發(fā)展，為抗血管生成治療提供幫助。 隨著分子生物學(xué)和免疫病理學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，TP與腫瘤 血管生成的生物治療技術(shù)將得到更加廣泛和深入的研究[11]， 對(duì)TP的深入研究將會(huì)為腫瘤的治療提供更多有效的途徑。 
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          （責(zé)任編輯：鐘婷婷）