OX40在免疫耐受中的調(diào)節(jié)作用

        【摘要】T細(xì)胞的激活不僅需要T細(xì)胞受體與靶細(xì)胞表面的抗原肽一主要組織相容性復(fù)合物特異性結(jié)合產(chǎn)生的信號，還需要共刺激分子傳導(dǎo)的第二信號。OX40就是共刺激分子之一，其與配體 OX40L的相互作用對維持T細(xì)胞活化后的進一步擴增、存活、分化為效應(yīng)細(xì)胞及記憶性T細(xì)胞具有重要作用。阻斷這一信號通路對增強免疫耐受，治療移植排斥反應(yīng)具有重要價值。近年來OX40在免疫耐 受中對不同類型T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用及其在器官移植及移植物抗宿主病中應(yīng)用的研究備受矚目：

        【關(guān)鍵詞】 OX40；OX40L;免疫耐受
        OX40屬于腫瘤壞死因子受體超家族成員，是I型跨膜糖蛋白，主要表達于活化的T細(xì)胞表面，包括CD4+T細(xì)胞、CD8 +T細(xì)胞、Th2、Thl、Th17細(xì)胞及Foxp3+ CD4+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg.)1，其配體OX40L主要表達于激活的抗原遞呈細(xì)胞（樹突狀細(xì) 胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞）L 3。。OX40/OX40L相互作用在免疫耐受中起著非常重要的調(diào)節(jié)作用，近年來，此研究備受國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。 1 0X40在免疫耐受中對T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用 1.10X40與效應(yīng)性T細(xì)胞在抗原刺激下OX40在活化的CD4+T細(xì)胞及 CD8 +T細(xì)胞表面表達持續(xù)24 - 72 h，主要作用于T細(xì) 胞的效應(yīng)階段，促進效應(yīng)T細(xì)胞的擴增及存活。4。。 研究發(fā)現(xiàn)，腎移植后發(fā)生急性排斥反應(yīng)的病人外周血單個核細(xì)胞( PBMCs)中OX40 mRNA水平顯 著高于健康對照組及未發(fā)生排斥反應(yīng)的腎移植患 者∞1，而在體外用CD3單抗刺激PBMCs并用人重組OX40-Fc融合蛋白在體外阻斷其OX40-OX40L通路能顯著降低Thl型細(xì)胞因子（INF一吖）及'I'h2型 細(xì)胞因子( IL-4)表達水平。6]。這提示移植排斥反應(yīng)可能與效應(yīng)性T細(xì)胞激活后表達OX40增加有關(guān)， 而阻斷OX40信號通路可能會增強免疫耐受。有學(xué) 者進一步研究發(fā)現(xiàn)，在體外用CBA小鼠脾細(xì)胞刺激輻射B6小鼠的脾細(xì)胞，CD4+T細(xì)胞從第二天起表達OX40增加，第五天達到高峰，用OX40阻斷性抗體阻斷OX40-OX40L信號通路可以抑制CD4”r細(xì) 胞介導(dǎo)的皮膚移植排斥反應(yīng)，但阻斷OX40-OX40L信號通路對T細(xì)胞的激活和擴增無影響，但是可以促進活化效應(yīng)性T細(xì)胞的凋亡，使其無法聚集在外周淋巴結(jié)進而遷移至皮膚移植物附近，從而增強機體對移植物的免疫耐受作用此外，OX40對CD8+T細(xì)胞的影響也是如此一在體外用同種異體抗原刺激CD8+T細(xì)胞可以使其OX40表達增加，而阻斷OX40信號通路使活化T細(xì) 胞凋亡增加。同樣地，在體內(nèi)抗OX40抗體可以抑 制CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的皮膚移植排斥反應(yīng)，阻斷OX40對BM3 T細(xì)胞的激活和擴增無影響但是使效 應(yīng)性T細(xì)胞聚集減少。因此，阻斷OX40信號轉(zhuǎn) 導(dǎo)可以促進效應(yīng)T細(xì)胞的凋亡，從而能夠抑制排斥 反應(yīng)，增強免疫耐受。

        1.2 0X40與Tre gsrrregs是CD4+T細(xì)胞中的一類重要亞群，在體內(nèi)、外具有抑制免疫反應(yīng)，維持免疫耐受的重要作用，其中CD4+ Foxp3+ Tregs尤為重要。Foxp3+Tregs表達多種細(xì)胞表面分子，OX40便是其中之一， 并在Foxp3+ Tregs介導(dǎo)的免疫耐受中發(fā)揮重要的調(diào) 節(jié)作用iij。研究發(fā)現(xiàn)，OX40可以促進小鼠體內(nèi)Foxp3+ Tregs的擴增，但是擴增的Tregs因Foxp3及 CD25表達水平降低而影響其免疫抑制功能，因此具有易“疲勞”的特點。但是Tregs的這種疲勞表型可以被外源性IL-2阻斷，OX40和IIJ-2激動劑聯(lián)合應(yīng) 用在小鼠體內(nèi)可以引起Tregs的進一步擴增，并且擴增的Tregs具有較強的抑制功能，在心臟移植模型中可以促進移植物的長期存活，增強免疫耐受因此，OX40可以促進Tregs的免疫抑制作用，增強免疫耐受，但是需要IL-2的協(xié)同作用。

        1.3 0X40與記憶性T細(xì)胞
        記憶性T細(xì)胞是誘導(dǎo)移植耐受的一個重要障礙，但是目前對調(diào)節(jié)記憶性T細(xì)胞介導(dǎo)排斥反應(yīng)的 分子通路卻研究較少。研究證實，在皮膚移植模型 中記憶性T細(xì)胞誘導(dǎo)同種異體皮膚移植排斥反應(yīng)記憶性T細(xì)胞表面高表達OX40 .4-1BB及icos分．子。在僅阻斷CD28/CD154的情況下記憶性T細(xì)胞可誘導(dǎo)同種異體皮膚移植排斥反應(yīng)，但是聯(lián)合阻 斷 OX40/OX40L及CD28/CD154通路可以誘導(dǎo)吱 膚移植物的長期存活，提示OX40/OX40L共刺激通 路對于維持記憶性T細(xì)胞的功能具有重要作OX40L單克隆抗體阻斷OX40-OX40L信號通路的同時聯(lián)合阻斷CD40/CD40L及LFA-l/JCAMI-l通 路可以使記憶性T細(xì)胞數(shù)量下降，延長二次心臟移植物的存活時間。 此外，有研究發(fā)現(xiàn)阻斷OX40-OX401.信號通路抑制憶性T細(xì)胞的擴增，并且誘導(dǎo)其凋亡，進而 增強對移植物的免疫耐受。
        2 0X40在移植免疫耐受中的應(yīng)用
        2.10X40與器官移植 近，等‘16]在胰島移植的糖尿病小鼠體內(nèi)以慢病毒為載體構(gòu)建靶向作用于OX40L的小干擾RNA重組體，從而阻斷小鼠體內(nèi)OX40/OX40L信號通路，同時激活程序性死亡因子I( PDI)及其配體·PI)I。這一信號通路，在胰島移植的糖尿病小鼠體 內(nèi)可以抑制T細(xì)胞的活化，與PD1及其配體PDL1具有協(xié)同作用，可以延長移植物的存活時間。 wang等研究發(fā)現(xiàn)，在進行心臟移植的小鼠體內(nèi)通過抗ox40L單克隆抗體阻斷OX40/OX40L信號通路能夠顯著降低心臟移植物細(xì)胞浸潤及細(xì)胞因子（IFN-Y,TNF-α和TGF-p）的表達，可以阻止記憶性T細(xì)胞介導(dǎo)的心臟移植物I血管病變的發(fā)生，增強免疫耐受作用。 Kinnear等 對小鼠皮膚移植排斥反應(yīng)模型研究發(fā)現(xiàn)，阻斷其ox40-OX40L信號通 路可以阻止初始型和記憶性CD4-T細(xì)胞的激活和聚集，進而阻止其對移植抗原的免疫反應(yīng)。同時，阻 -斷ox40促進Tregs的生存及再生可以增強其對T細(xì)胞反應(yīng)的抑制作用：
        2.2 ox40與移植物抗宿主病
        對動物模型的研究發(fā)現(xiàn)，OX40-OX40L信號通 路在移植物抗宿主病( GVHD)發(fā)病機制方面具有重 要作用大鼠骨髓移植模型中GVHD的淋巴造血器官內(nèi)表達OX40的T細(xì)胞增多，同樣地，異基因骨 髓移植后GVHD小鼠體內(nèi)CD4+和CD8+T細(xì)胞ox400表達上調(diào)。GVHD模型中OX40+T細(xì)胞增多引起大家對阻斷OX40-OX40L途徑進而影響 GVHD相關(guān)研究的關(guān)注。輻射小鼠接受MHC不匹配T細(xì)胞后應(yīng)用OX40L阻斷性抗體治療可以降低 GVHD引起的死亡率。相反，激發(fā)性O(shè)X40抗體顯 著增加該模型的死亡率。另有研究證實，野生型 C57BL/6小鼠的CD4+T細(xì)胞轉(zhuǎn)移入輻射小鼠 H_2bm'2體內(nèi)可以引起致命性CVHD，而野生型Ox40-／_CD4+T細(xì)胞轉(zhuǎn)移人同樣的模型小鼠體內(nèi)則 不引起致命性GVHD[2'-22]。這說明0X40-0＼401。通 路促進CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的CVHD，且'\F-KB誘導(dǎo)激酶在此過程中發(fā)揮重要作用。 臨床研究發(fā)現(xiàn)，OX40參與CvHD的發(fā)展，異 基因造血干細(xì)胞移植( SCT)后急性GVHD病人體 內(nèi)CD4+ OX40 +T細(xì)胞及CD8+ OX40+T細(xì)胞數(shù)量顯著增加[23]。此外，SCT后慢性GVHD病人體內(nèi)OX40 +T細(xì)胞數(shù)量也顯著增加，且類固醇治療后數(shù)量顯著降低[24]。體外去除同種反應(yīng)性O(shè)X40 +T細(xì) 胞后，盡管T細(xì)胞仍具有識別第三方抗原的特異 性，但對同種異體特異性抗原的識別能力反應(yīng)降 低?？傊?，所有臨床前數(shù)據(jù)顯示阻斷OX40-OX40L通路可能為GVHD的治療提供一個重要靶點-如一：

         3結(jié)語

        OX40/OX40L對機體免疫應(yīng)答具有重要的調(diào)節(jié)作用，阻斷OX40/OX40L信號通路可增強機體的免 疫耐受作用，使移植器官在受者體內(nèi)避免受到免疫 攻擊作用，實現(xiàn)其長期存活，減少GVHD的發(fā)病率及死亡率。因此，干預(yù)OX40/OX40L共刺激途徑有 望成為臨床治療中一個新的靶點。