出凝血檢測注意事項
文章來源:發(fā)布日期:2008-05-15瀏覽次數(shù):70646 開展凝血檢測對臨床疾病的診斷具有重要意義,除了對出血疾病的篩選與診斷外,還用于血檢前狀態(tài)的檢查,所以保證實驗結(jié)果準確性至關(guān)重要,現(xiàn)介紹如下。
1 標本的采集
(1)采集血標本前,要讓病人處于空腹和平靜狀態(tài),情緒激動、劇烈運動和神經(jīng)緊張會引起血小板數(shù)增多,血小板、凝血和纖溶活性的增強。
(2)采血時,止血帶不應扎得太緊或時間太長,因長時間結(jié)扎會使因子Ⅷ 和組織纖溶酶源激活劑(t—PA)釋放和活化。
(3)要用一次性塑料注射器和塑料試管,以減少血小板和凝血因子的活化.進針要順利,支注射器采血2ml應棄去再換另一支注射器取實驗用血,這樣可以避免混入組織液,血液與抗凝集要充分混勻;否則影響凝血檢測的準確性。
2 標本的儲存和運輸\r
(1)標本采集后打入塑料或硅化的試管內(nèi),并且立刻塞緊蓋子,否則會有CO2揮發(fā),PH增高,影響APTT、PT延長。
(2)要及早分離血漿,好在2h內(nèi)分離出來,對于當前不能做的標本,可將血漿分離分裝在帶塞子的塑料管內(nèi),冷凍在一20℃的冰箱內(nèi),對需要存較長時間的標本冰凍存于一80℃的冰箱內(nèi),冰凍的血漿融化時不能靜置于室溫中逐漸融化,這樣會有纖維蛋白遇冷沉淀蛋白析出,應放置37~C水浴中輕輕搖動,使其迅速溶化。
(3)標本需要在室溫下運送,必須室溫運送,因低溫會損傷血小板,活化因子Ⅶ和因子Ⅺ ,使PT、APTT結(jié)果縮短。必需低溫的標本要在4℃以下運送,以防止因子V和因子Ⅱ降解。
3 試劑的選擇\r
3.1 抗凝劑要用抗凝劑為0.109moL/L的檸檬酸鈉,它能有效地阻止因子V和Ⅷ的活化,嚴格按1:9的比例抗凝,當HCT>55%或<25% 時,應按如下公式重新核算抗凝劑的用量,抗凝劑量(m1)=0.00185×全血量(m1)×[100一HCT(%)]:不應使用變質(zhì)的枸櫞酸鹽溶液,否則會使PT、APTT試驗結(jié)果偏低。
3.2 檢測試劑 按照儀器的性能選用儀器配套的試劑,進口儀器,選用進口配套試劑,否則結(jié)果不準確,復溶的試劑,好是現(xiàn)用現(xiàn)配,否則復溶后放置時間越長,越容易影響結(jié)果的準確性,暫時不用的復溶試劑要及時放回冰箱內(nèi)冷藏。
4 儀器設備
儀器狀態(tài)的好壞,直接影響實驗的結(jié)果,所以全自動凝血儀要放在避光、透風的室內(nèi),并且要保證室內(nèi)溫度控制在25℃左右,開機前要做好準備工作,檢查儀器的各個部件,看是否有異常,做好每天的保養(yǎng)和維護,確保儀器的正常運行。
5 技術(shù)\r
要嚴格按照操作規(guī)程操作,熟練掌握實驗原理方法和步驟,做到熟能生巧,精益求精。