靶向胰腺癌的新型免疫治療途徑
文章來源：360國際醫(yī)療網(wǎng)發(fā)布日期：2024-12-16瀏覽次數(shù)：1 本研究中，研究人員首先研究了靶向c-MET的CAR-M細胞在胰腺癌中的作用。研究人員發(fā)現(xiàn)，與配對的癌旁組織相比，c-MET在腫瘤組織中高表達，c-MET高表達與較差的患者生存相關(guān)。研究人員利用人單核細胞系THP-1和靶向c-MET的hMDM （CAR-M-c-MET）構(gòu)建了CAR-M細胞。CAR-M-c-MET細胞與胰腺癌細胞具有高度的特異性結(jié)合能力，并表現(xiàn)出比促炎極化控制巨噬細胞更強的吞噬和殺傷能力。此外，CAR-M-c-MET細胞與多種細胞毒性化療藥物有協(xié)同作用。在NOD/SCID小鼠模型中，腹腔注射CAR-M-c-MET細胞可快速遷移至腫瘤組織并抑制腫瘤生長，且未導致明顯不良反應。細胞因子陣列和mRNA測序表明，CAR-M-c-MET產(chǎn)生的免疫激活劑水平高于對照巨噬細胞。這項研究為CAR-M治療胰腺癌的安全性和療效提供了令人信服的證據(jù)。結(jié)果表明CAR-M-c-MET抑制胰腺癌的進展，并增強細胞毒性化療的有效性。值得注意的是，沒有明顯的副作用發(fā)生。 背景信息 胰腺癌仍然令人生畏，全球發(fā)病率在上升。盡管胰腺外科手術(shù)和細胞毒性化療方面的進步導致更多患者能夠安全地接受手術(shù)治療并改善了生存率，但所有患者的5年總體生存率仍低于10%，即使對于沒有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的局部胰腺癌也僅為約40%至45%。此外，對標準的四藥聯(lián)合療法（Folfirinox）的響應率僅為三分之一左右。迫切需要新的治療模式來進一步改善這種不良預后和治療反應。 免疫檢查點抑制劑（ICI）和嵌合抗原受體T細胞（CAR-T）是臨床免疫療法的兩個里程碑。然而，這兩種療法在胰腺癌中的效果都非常有限。巨噬細胞是胰腺癌組織中常見的免疫細胞。腫瘤相關(guān)巨噬細胞（TAMs）的功能是多方面的。雖然巨噬細胞具有強大的吞噬能力，可以調(diào)節(jié)免疫反應，但它們也會通過各種炎癥過程促進腫瘤進展和化療耐藥性。靶向TAM的免疫療法在過去十年中備受關(guān)注。與CAR-T相比，由于其具有腫瘤浸潤能力、吞噬能力和低移植物抗宿主疾病（GVHD）風險，嵌合抗原受體巨噬細胞（CAR-M）在實體腫瘤治療中具有特定優(yōu)勢。然而，CAR-M在胰腺癌中的作用尚未得到研究。 C-MET是MET家族的酪氨酸激酶受體，其配體為肝細胞生長因子（HGF）。在胰腺癌中，異常激活的HGF/C-MET通過刺激PI3K/AKT、Ras/MAPK、JAK/STAT和Wnt/β-catenin信號通路促進腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。幾項體外研究報道，在胰腺癌中抑制C-MET可減少腫瘤的轉(zhuǎn)移并增強化療的療效。 CAR-M-c-MET可提高胰腺癌細胞的化療細胞毒性效應 研究人員研究了CAR-M療法與各種化療藥物的聯(lián)合應用，以探索潛在的協(xié)同效應。首先，將BxPC-3 luci+細胞與藥物共培養(yǎng)24小時。通過生物熒光信號檢測殘留的BxPC-3細胞，研究人員發(fā)現(xiàn)CAR-THP-1單藥治療與單獨的細胞毒性化療藥物的療效相當。令人驚訝的是，同時給予細胞毒性化療藥物和CAR-THP-1會導致殘留腫瘤細胞減少。而且，在共培養(yǎng)上清液中LDH水平的量化結(jié)果也證實了這些觀察結(jié)果，進一步支持了聯(lián)合療法增強腫瘤細胞殺傷的作用。 與胰腺癌細胞共培養(yǎng)后，CAR-M-c-MET顯示出激活的免疫狀態(tài) 為了闡明CAR-M介導的腫瘤細胞殺傷機制以及CAR-M細胞的表型變化，采用了巨噬細胞轉(zhuǎn)錄組測序，并對共培養(yǎng)上清液進行了細胞因子微陣列分析。研究顯示，CAR-THP-1細胞的GM-CSF分泌量升高，而IL-10分泌量則降低，這表明在共培養(yǎng)體系中，CAR-THP-1細胞在遇到腫瘤細胞表面抗原后逐漸向促炎表型轉(zhuǎn)變。相比之下，NC-THP-1細胞缺乏激活信號，傾向于抗炎表型。 研究顯示，CAR THP-1和NC THP-1在轉(zhuǎn)錄組水平上存在差異。轉(zhuǎn)錄組分析進一步闡明了CAR THP-1和NC THP-1之間的差異，差異表達基因主要富集在細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導、基因轉(zhuǎn)錄和免疫信號通路中。富集的細胞組分包括免疫突觸形成和細胞膜轉(zhuǎn)運，這強調(diào)了這些過程在CAR-M介導的腫瘤細胞殺傷中的作用。 此外，研究人員發(fā)現(xiàn)，與腫瘤細胞共培養(yǎng)后，CAR THP-1細胞更傾向于表現(xiàn)出促炎表型。 CAR-M-c-MET可抑制小鼠胰腺癌模型中的腫瘤進展 為了進一步驗證CAR-M療法的有效性，研究人員在免疫缺陷小鼠中建立了使用BxPC-3 luci+細胞的原位胰腺腫瘤模型。手術(shù)后5天，每周一次通過腹腔內(nèi)注射CAR THP-1細胞，并使用小型動物成像設備每周監(jiān)測腫瘤負荷。結(jié)果顯示，接受CAR-THP-1細胞治療的小鼠生存時間較對照組延長，同時腫瘤負荷減少。通過生物熒光成像對腫瘤負荷進行定量分析，也得到了一致的結(jié)果。 通過對小鼠特定器官切片的HE染色發(fā)現(xiàn)，PBS組和NC組THP-1小鼠肝臟中分布有許多微轉(zhuǎn)移灶，而CAR組THP-1小鼠肝臟中未見微轉(zhuǎn)移灶。HE染色和TUNEL染色顯示CAR - THP-1組胰腺腫瘤出現(xiàn)較大的壞死區(qū)域。包括肺、胃和腸在內(nèi)的重要器官沒有器官損傷的證據(jù)。血清肝腎功能、心肌酶、胰腺功能、炎性蛋白、鈣磷代謝等指標表明，CAR - THP-1對小鼠重要器官功能無明顯影響，安全性可靠。通過體重和曠場實驗也證實了CAR - THP-1的安全性。 而且，與NC THP-1相比，CAR - THP-1顯示出特異性的腫瘤內(nèi)遷移能力。 結(jié)論 本研究證明了CAR-M-c-MET在體外和體內(nèi)模型治療胰腺癌的安全性和有效性。CAR-M-c-MET細胞具有抑制胰腺癌進展和提高細胞毒性化療療效的能力。而且，在小鼠模型中未觀察到明顯的副作用。
