新生期大鼠母愛剝奪對成年后自發(fā)活動的影響

【摘要】  目的：觀察新生期母愛剝奪對大鼠成年后自發(fā)活動的影響。方法：將母鼠隨機(jī)分為母愛剝奪(MD)組(所生仔鼠在出生后第2～21d每天母嬰分離1h)和正常對照(N)組(所生仔鼠不做任何處理)。仔鼠成年后予慢性應(yīng)激，用開場試驗觀察大鼠自發(fā)活動的改變。結(jié)果：MD組再次受到慢性應(yīng)激后可引起自發(fā)活動總路程與周邊路程的顯著減少(P<0.001)，休息時間增加(P<0.01)。結(jié)論：新生期大鼠母愛剝奪可引起成年后自發(fā)活動減少，導(dǎo)致抑郁樣行為。

【關(guān)鍵詞】  母愛剝奪 抑郁樣行為 自發(fā)活動

　　Effect of Neonatal Maternal Deprivation on the Locomotion Activity in Adult Rats

　　LI Ying_ying，HUANG Qing_jun

　　(Mental Health Center of Shantou University，Shantou  515063， China)

　?。跘bstract］ob[x]jective：To investigate the effect of neonatal maternal separation on the locomotion activity in adult rats. Methods：The neonatal SD rats were randomly divided into maternal separation group(one hour daily maternal separation on postnatal day 2～21)and control group(no handing on postnatal day 2～21). The rat received chronic stresses in adult period. The autonomic behavior was determined by animal behavior analysis system. Results：In the maternal separation group after chronic stress,the total distance and the surrounding distance of rats gradually decreased(P<0.001), and the rest time increased(P<0.01). The neonatal maternal separation can decrease locomotion activity in rats, it can cause behavior depression in posse.

　　［Key Words］neonatal maternal separation; behavior depression; locomotion activity

　　生命早期應(yīng)激(Early life stress，ELS)是多種精神疾病的重要風(fēng)險因素，可誘發(fā)重性抑郁癥、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙、兒童注意缺陷癥及精神分裂癥等［1］。精神疾病的遺傳因素、生命早期環(huán)境因素和成年后環(huán)境因素［2］強(qiáng)調(diào)了生命早期環(huán)境因素在精神疾病發(fā)病中的作用。建立ELS對成年后行為影響的動物模型，可為進(jìn)一步研究ELS的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制提供研究平臺。本實驗以新生期母嬰分離［3］作為母愛剝奪的手段，觀察生命早期母愛剝奪對大鼠成年后自發(fā)活動的影響，并在大鼠成年后再次接受慢性應(yīng)激，觀察應(yīng)激對自發(fā)活動的影響，從而建立“母愛剝奪對成年后行為影響”的動物模型。

　　1  材料與方法

　　1.1  實驗動物分組
   
　　3月齡雌雄SD大鼠(中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供)體質(zhì)量200～280g，在光/暗周期為12h/12h、光照時間7：00～19：00的條件下飼養(yǎng)(自由攝食和飲水)，1周后分籠(每籠1只雄鼠，2只雌鼠)，待雌鼠懷孕后單籠飼養(yǎng)。生產(chǎn)后，每籠飼養(yǎng)10～12只新生大鼠和1只哺乳期母鼠。將仔鼠分為母愛剝奪(MD)組和對照組(N),MD組在出生后第2～21d每天母嬰分離1h［將母鼠拎出放入一籠中，然后將新生大鼠放入另一籠，并入溫育箱(32.0±0.5)℃］。1h后將新生大鼠送回初籠中與母鼠團(tuán)聚。N組不做任何處理。MD組在出生4周后單籠飼養(yǎng)，N組每4只一籠正常飼養(yǎng)［4］。

　　1.2  大鼠自發(fā)行為的測定
   
　　采用DigBehv_LR4型動物行為分析系統(tǒng)(上海吉量軟件科技公司，中國)記錄并分析大鼠的自發(fā)活動。大鼠自主行為的檢測固定在15：00～17：00進(jìn)行，檢測時間5min。自發(fā)活動在開放場(40cm×40cm×65cm)進(jìn)行，并由紅外攝像系統(tǒng)和視頻合成器記錄大鼠活動；計算機(jī)分析系統(tǒng)分析大鼠運(yùn)動軌跡。監(jiān)視及分析下列行為改變：休息及活動時間、總路程、運(yùn)動線性度、速度、中央?yún)^(qū)活動時間路程、四周(四角和四邊)活動時間及路程，并以上述指標(biāo)來判斷大鼠的行為改變。

　　1.3  慢性應(yīng)激
   
　　大鼠滿2月齡后連續(xù)接受10d慢性應(yīng)激，1次/d接受空瓶應(yīng)激(4h)、晝夜顛倒、45℃熱刺激(10min)、夾尾(5min)、水平搖晃(45次/min，5min)中的1種，每種限用2次。

　　1.4  統(tǒng)計學(xué)處理
   
　　實驗結(jié)果用EXCEL和SPSS11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，結(jié)果以±s表示，數(shù)據(jù)分析用配對t檢驗和獨(dú)立樣本t檢驗。

　　2  結(jié)果

　　2.1  新生期母愛剝奪對成年后自發(fā)活動的影響
   
　　新生大鼠母嬰分離后正常飼養(yǎng)。分別在2月齡和3月齡時檢測大鼠的自發(fā)活動：MD組2月齡時，自發(fā)活動總路程、休息時間、中央路程以及周邊路程等與N組比均無統(tǒng)計學(xué)意義(圖1)；3月齡時，MD組活動總路程與N組比顯著減少(P<0.05)；雖然休息時間延長、中央路程和周邊路程縮短，但均無統(tǒng)計學(xué)意義(圖2)。結(jié)果表明新生期母愛剝奪的大鼠隨著鼠齡的增長，逐漸出現(xiàn)自發(fā)活動的抑制現(xiàn)象。

　　圖1  2月齡大鼠的自發(fā)活動（略）

　　Fig.1  The locomotion activity of 2_month_old rats

　　圖2  3月齡大鼠的自發(fā)活動（略）

　　Fig.2  The locomotion activity of 3_month_old rats

　　與N組比  *P<0.05

　　2.2  慢性應(yīng)激對成年后的母愛剝奪大鼠自發(fā)活動的影響
   
　　兩組在2月齡后接受10d慢性應(yīng)激，以開場試驗。結(jié)果顯示(表1)，兩組活動總路程顯著減少(P<0.001)、休息時間均大幅度延長(P<0.001)、中央路程顯著減少(P<0.01)。MD組應(yīng)激與N組比，總路程大幅度減少(P<0.001)、休息時間大幅度延長(P<0.01)、中央路程大幅度減少(P<0.01)。結(jié)果表明：慢性應(yīng)激可顯著抑制大鼠自發(fā)活動，而生命早期的母愛剝奪加重了慢性應(yīng)激對自發(fā)活動的抑制作用。

　　表1  2月齡母愛剝奪大鼠再次慢性應(yīng)激后的自發(fā)活動變化（略）

　　Table 1  The change of locomotion activity of 2_month_old maternal deprived rats after chronic stress

　　與N組比  1)P<0.01；2)P<0.001；與N組應(yīng)激比  3)P<0.001

　　3  討論
   
　　早期應(yīng)激可影響成年后學(xué)習(xí)記憶、性格特征和情緒能力等，對適應(yīng)社會、工作、學(xué)習(xí)產(chǎn)生重大影響，甚至增加精神障礙的發(fā)病率或犯罪率。近幾年對其生物學(xué)機(jī)制的研究雖有增加，但由于臨床研究的局限性和研究周期長等原因，對其機(jī)制仍知之甚少。而動物實驗可為ELS提供便利，建立穩(wěn)定可靠和易于檢測的動物模型，可以為研究ELS所致成年后行為改變及其神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫等生物學(xué)研究提供研究平臺。目前已有的生命早期應(yīng)激模型主要有雌性動物孕期(胎兒)應(yīng)激和新生動物應(yīng)激。母愛剝奪是人類生命早期的嚴(yán)重生活事件之一，對成年后的身心健康產(chǎn)生影響。因此，建立母愛剝奪動物模型，能更好地模擬人類ELS,為探討其生物學(xué)改變提供研究工具。
   
　　本實驗對新生大鼠施行母愛剝奪1h/d，在其成年早期(2月齡)未出現(xiàn)自發(fā)活動障礙，當(dāng)鼠齡增至3月齡時，其自發(fā)活動的總路程顯著減少，活動時間縮短，表明生命早期母愛剝奪可造成成年后行為異常。慢性應(yīng)激是人類抑郁癥的重要誘發(fā)因素之一［4］，不可預(yù)料的慢性應(yīng)激可誘導(dǎo)動物行為性抑郁［5］。本實驗在母愛剝奪大鼠成年后再次施行慢性應(yīng)激，發(fā)現(xiàn)早期母愛剝奪增加了成年后大鼠對應(yīng)激的反應(yīng)性。結(jié)果提示，早期母愛剝奪是大鼠成年后行為異常的重要原因。
   
　　ELS導(dǎo)致成年后認(rèn)知、記憶、情緒等精神活動的異常已經(jīng)被許多臨床回顧性研究所證實，其原因可能與神經(jīng)系統(tǒng)的損傷與再生、神經(jīng)生化改變、內(nèi)分泌改變等諸多因素相關(guān)。本動物模型的建立，將為進(jìn)一步研究提供便利。

【參考文獻(xiàn)】
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作者：李瑩瑩 黃慶軍

作者單位：汕頭大學(xué)精神衛(wèi)生中心，廣東 汕頭 515063