新研究揭示！MSCs在重癥急性胰腺炎中的治療作用

急性胰腺炎(AP)：是一種常見胃腸道疾病，全球發(fā)病率約為34/100000人每年，AP嚴(yán)重程度可以是輕度、中度或重度，這取決于胰腺內(nèi)部和周圍局部損傷程度，更重要的是對遠(yuǎn)端器官的全身損傷。

重癥急性胰腺炎（SAP）是指伴有全身炎癥及局部并發(fā)癥的AP，屬于AP特殊類型，遠(yuǎn)端器官（呼吸、心血管或腎臟）衰竭被認(rèn)為是不良結(jié)局的主要因素，AP總體死亡率約為2%，但在SAP患者中接近30%。

到目前為止，SAP中器官衰竭(OF)的管理在很大程度上仍然是支持性的，迫切需要有效治療手段來延緩或逆轉(zhuǎn)OF進(jìn)展。 既往研究表明，間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)可以抑制炎癥反應(yīng)，從而減輕AP期間胰腺的局部損傷。Jung等證明MSCs可以減少AP大鼠的濾泡細(xì)胞變性、胰腺水腫和炎癥細(xì)胞浸潤，并減少炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子的表達(dá)。

近日，中國人民解放軍總醫(yī)院研究人員在《Cell Press》旗下期刊發(fā)表了一篇關(guān)于MSCs治療SAP小鼠實(shí)驗(yàn)，文獻(xiàn)中探討了兩種不同MSCs對全身炎癥和胰腺組織損傷的治療反應(yīng)以及對遠(yuǎn)端器官腎、肺和心臟的影響。

SAP動(dòng)物模型建立方法：6只小鼠接受5%牛磺膽酸鈉溶液膽管注射(SAP模型)24h后被安樂死，6只小鼠接受麻醉、剖腹手術(shù)和膽管穿刺而不注射液體(假手術(shù))，24h后被安樂死，術(shù)后通過血清和組織病理學(xué)分析確定胰腺局部損傷以及腎臟、肺和心臟組織的全身損傷，以確定SAP模型是否成功建立。

組織病理學(xué)結(jié)果顯示，與對照組和假手術(shù)組相比，模型小鼠的胰腺、腎臟和肺出現(xiàn)明顯組織損傷，MPO染色顯示損傷組織中有中性粒細(xì)胞浸潤。結(jié)果表明膽管注射5%?；悄懰徕c溶液24 h后SAP小鼠模型成功建立。 ②SAP小鼠全身炎癥反應(yīng)：在SAP組中，ELISA顯示血清中促炎細(xì)胞因子（TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β）水平升高，抗炎因子（IL-10）水平降低。MSCs輸注后，TNF-α、MCP-1、IL-6和IL-1β水平均降低，而IL-10表達(dá)升高。這些結(jié)果表明，MSCs輸注減輕了SAP小鼠全身炎癥反應(yīng)。

此外，還發(fā)現(xiàn)UC-MSCs在抑制血清TNF-α和提升IL-10水平方面效果明顯更強(qiáng)，而BM-MSCs組未能逆轉(zhuǎn)IL-10血清水平的降低，表明UC-MSCs在改善SAP系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)方面可能比BM-MSCs更有效。 ③MSCs可減輕SAP小鼠胰腺損傷：在SAP組中表現(xiàn)出明顯的血清淀粉酶升高，而MSCs治療后血清淀粉酶升高受到抑制；在轉(zhuǎn)錄水平上，qRTPCR分析顯示，MSCs輸注后胰腺組織中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β水平降低，IL-10水平升高；在蛋白質(zhì)水平上，ELISA顯示MSCs輸注后胰腺組織中TNF-α、MCP-1、IL-6 和IL-1β水平同樣降低，IL-10水平只有UC-MSCs組升高，BM-MSCs組則。

組織學(xué)顯示UC-MSCs治療后病理評分降低，胰腺壞死較少，而MPO染色顯示兩種MSCs都能夠減輕中性粒細(xì)胞浸潤胰腺 。此外，與BM-MSCs相比，UC-MSCs 輸注還促使MCP-1、IL-6轉(zhuǎn)錄水平和TNF-α、IL-1β蛋白水平降低，IL-10的轉(zhuǎn)錄和蛋白水平升高。這些結(jié)果表明MSCs輸注有效緩解了SAP小鼠胰腺損傷，其中UC-MSCs顯示出比BM-MSCs更大的治療潛力。 ④MSCs可減輕SAP小鼠腎損傷：腎臟是SAP受影響的器官之一，我們在SAP模型中觀察到的急性腎損傷，在MSCs治療后損傷明顯減輕，幾乎降至正常水平，尤其是UC-MSCs治療后。在轉(zhuǎn)錄水平上，qRTPCR分析顯示，MSCs輸注后腎組織中TNF-α、MCP-1、IL-6和IL-1β水平降低，IL-10水平升高；在蛋白質(zhì)水平上，ELISA顯示MSCs治療后腎組織中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β水平降低，IL-10水平升高。 組織學(xué)顯示MSCs治療后腎臟病理評分降低，MPO染色表明MSCs能夠抑制腎臟中的中性粒細(xì)胞浸潤。與BM-MSCs相比，UC-MSCs治療后TNF-α、MCP-1、 IL-1β的轉(zhuǎn)錄水平和TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白水平降低，IL-10的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)水平升高在組織學(xué)和中性粒細(xì)胞浸潤方面，UC-MSCs誘導(dǎo)的改善比BM-MSCs更明顯，這些結(jié)果表明MSCs輸注有效減輕了SAP小鼠的腎損傷，其中UC-MSCs顯示出優(yōu)于BM-MSCs治療效果。 ⑤MSCs可減輕SAP小鼠肺損傷：肺是SAP另一個(gè)常見受累器官，我們在SAP模型中也觀察到了明顯的肺損傷，MSCs 處理后明顯緩解。在轉(zhuǎn)錄水平上，qRT-PCR分析顯示，MSCs治療后肺組織中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β水平降低，IL-10水平升高；在蛋白質(zhì)水平上，ELISA顯示MSCs治療后肺組織中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β水平降低，IL-10水平升高，但BM-MSCs卻沒有。 組織學(xué)顯示，MSCs治療后肺部病理評分降低，同時(shí)MPO染色表明MSCs能夠抑制肺部中性粒細(xì)胞浸潤。與BM-MSCs相比，UC-MSCs治療后MCP-1、IL-6、IL-1β的轉(zhuǎn)錄水平和TNF-α、IL-6、IL-1β的蛋白水平降低，IL-10的蛋白水平升高。在組織學(xué)方面，UC-MSCs誘導(dǎo)的改善比BM-MSCs更明顯，這些結(jié)果表明MSCs輸注可有效減輕SAP小鼠的肺損傷，與對胰腺和腎損傷的作用類似，UC-MSCs在改善肺損傷方面表現(xiàn)出比BM-MSCs更好的治療效果。 ⑥MSCs可減輕SAP小鼠心臟損傷：據(jù)報(bào)道SAP或膿毒癥會導(dǎo)致心肌功能障礙或循環(huán)衰竭并伴有血清標(biāo)志物短暫升高，我們在SAP組中檢測到血清CK-MB升高，如果不治療，血清CK-MB會自發(fā)降低，MSCs治療后血清CK-MB水平會進(jìn)一步下降。 MSCs治療后心肌組織中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)水平降低，IL-10水平升高。值得注意的是，UC-MSCs在改善TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β和IL-10 轉(zhuǎn)錄水平以及IL-1β蛋白水平上表現(xiàn)出更優(yōu)異的性能。這些結(jié)果表明，盡管在我們的模型中心臟效應(yīng)輕微且短暫，但MSCs輸注可有效抑制心臟組織中的炎癥反應(yīng)，且UC-MSCs對心臟組織的影響似乎比BM-MSCs更強(qiáng)。

總 結(jié)：上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，MSCs輸注可減輕SAP小鼠全身炎癥以及胰腺和多器官損傷，且與BM-MSCs相比，UC-MSCs表現(xiàn)出了更優(yōu)異的治療效果，這表明UC-MSCs可能是SAP患者基于MSCs療法的佳選擇。